Après une formation de comédienne au Théâtre National de Strasbourg, Isabelle Rattier joue, au théâtre, sous la direction de Gildas Bourdet, Carlo Boso, Dominique Muller, Stuart Seide…

En 2009, les monologues du vagin d'Eve Ensler au Théâtre Michel.
En 2007, La femme placard de Chantal Alves Malignon.
En 2001, elle adapte et met en scène et interprète Senso au Palais des Glaces.

D’abord assistante de Bernard Murat, Adrian Brine et Pierre Mondy, elle a depuis mis en scène :
Cher menteur de Jérôme Kilty au Théâtre du Petit Marigny, avec Catherine Arditi et Jean-François Balmer, 
Andromaque au Théâtre du Tourtour, 
Les monologues du vagin d'Eve Ensler, m.e.s. Isabelle Rattier, au Palais des Glaces, à la Comédie de Paris et enfin au Petit Théâtre de Paris avec, entre autres, Bernadette Lafont, Princess Erika, Sonia Vollereaux, Firmine Richard, Hélène Delavault, Lisette Malidor, Virginie Lemoine, Nathalie Corré, Nicole Calfan, Sapho, Véronique Jannot, Nicole Croisille, Guesh Patti, Caroline Loeb, Alexandra Kazan, Andréa Ferréol...

Isabelle Rattier est par ailleurs Professeur à l’Ecole du Théâtre National de Chaillot depuis 1995.

Au cinéma et à la télévision, on la remarque également sous la direction de Charles Brabant, Luis Bunuel, Pierre Boutron, Gérard Vergez, Olivier Peray…